客服热线:400-901-9800          客服QQ:4009019800          技术答疑   技术支持   质量反馈   人才招聘   联系我们
首页 > lol外围动态 > 正文
流式细胞检测--标本的制备方法
发表者:北京lol外围-lol外围投注-app下载生物      发表时间:2016-2-15
流式细胞检测标本样品的制备方法(供参考) 1 目标细胞原本就处于单细胞状态,如单细胞悬液制备就比较简单。 2 目标细胞来源于外周血(PBMC,外周血单核细胞),用FICOLL密度梯度离心,单个核细胞再用PBS洗涤重悬即可。 3 目标细胞来源于胸水、腹水、脑脊液等,只要将各种体液离心沉淀,PBS洗涤几次,用滤网过滤即可。 4 目标细胞是体外培养的细胞,若为悬浮细胞,直接收集即可。 5 目标细胞若是贴壁细胞,用胰酶消化后收集即可。 6 目标细胞是免疫器官内的细胞:如骨髓、胸腺、脾、淋巴结等,由于这些组织器官主要有免疫细胞组成,细胞与细胞之间的紧密接触很少,而且其中含有的纤维结缔组织较少,所以可以直接采用机械研磨法得到单细胞悬液。 7 骨髓比较特殊,其组织疏松,使用研磨法磨碎,然后用滤网过滤一次就可以得到单细胞悬液。注意:研磨棒与组织接触的部位不要太硬,最好是有一定弹性的橡胶(如注射器的内芯),同时研磨时不要太用力,否则得到的单细胞悬液含有很多死细胞和细胞碎片,影响实验结果。 8 目标细胞来自实体器官,如肺、肝脏等,可用酶消化法得到单细胞悬液。将实体脏器用剪刀剪成细小碎片,加入用于消化的IV型胶原酶,置于37℃孵箱中消化,消化的时间根据脏器的不同而定,然后用研磨棒磨碎过滤即可得到单细胞悬液。 9 肿瘤组织也可采用上述方法。
版权所有 2016-2020 www.bioss.com.cn lol外围-lol外围投注-app下载 京ICP备05066980号 京公网安备110107000727号
通过国际质量管理体系ISO9001:2008 GB/T19001-2008认证    编号:00115Q211807R1M/1100